恙虫病东方体Karp株56-kDa外膜抗原基因片段的原核表达及免疫原性研究

• 作 者: 王园园 陈强 于强 张丽娟
• 机 构: 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,石河子大学动物科技学院
• 出 处: 临床检验杂志
• 发表日期: 2012年1期
• 关键词: 恙虫病东方体 Karp株 56-kDa外膜蛋白 原核表达 免疫原性 Orientia tsutsugamushi strain Karp 56-kDa p
• 基金项目: 国家科技部“973”项目（2010CB530200,2010CB530206）,艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治科技重大专项（2009ZX10004-203,2008ZX10004-008）.

目的探讨恙虫病东方体56-kDa蛋白在大肠埃希菌中的表达及作为诊断性抗原的可行性。方法用PCR扩增恙虫病东方体Karp菌株编码56-kDa蛋白长约1 100bp的DNA,克隆至表达载体pET30a（＋）。表达产物经SDS-PAGE、质谱分析及western blot鉴定分析。重组蛋白质纯化后作为包被抗原,用方阵实验确定最佳浓度包被,ELISA法检测其与立克次体目16种成员及10种致病菌阳性血清的反应性。用此重组蛋白质免疫小鼠后制备抗血清,分别用ELISA及间接免疫荧光法（IFA）检测抗血清的效价。结果重组