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目的：构建含有胰腺十二指肠同源框1（PDX-1）基因的真核表达载体，并提高重组载体在骨髓间质干细胞（MSCs）的表达效率，为骨髓MSCs作为糖尿病基因治疗的靶细胞奠定基础。方法：RT—PCR体外扩增PDX-1基因，双酶切后整合入相同双酶切的真核表达载体构建重组载体，对重组载体进行酶切分析和序列测定进行鉴定；利用Percoll细胞分离液体外培养大鼠骨髓MSCs，流式细胞仪检测细胞周期后，Superfect介导正确重组的载体转染骨髓MSCs，检测转染效率和细胞存活率从而对转染条件进行优化；G418筛选阳性细胞