猪繁殖与呼吸综合征病毒HB-3（cz）杉ORF5基因序列分析及原核表达

• 作 者: 刘涛 陈赛娟 曹洪战 刘子伟 朱子杰 苏霞 孙继国
• 机 构: 商务部流通产业促进中心,河北农业大学动物科技学院,河北省保定市北市区动物防疫监督站
• 出 处: 中国兽医杂志
• 发表日期: 2008年12期
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 河北分离株 ORF5基因 原核表达 porcine reproductive and respiratory syndrome viru
• 基金项目: 河北省重大技术创新项目（07221008Z）

从河北沧州分离到1株疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒，接种Marc-145细胞，经过4代盲传后，出现细胞病变，经鉴定为PRRSV，命名为H13-3（cz）株。根据GenBank公布的PRRSV CH—1a株ORF5基因的核苷酸序列，设计合成一对特异性引物（P1／P2），用RT-PCR方法扩增完整ORF5基因，将扩增产物连接到pGM-T载体并转化克隆菌，阳性重组质粒进行序列测定与分析。再设计另一对引物（P3／P4）从重组载体pGM—ORF5中扩增出缺失了N端28个氨基酸残基的tGP5的编码序列tORF5，克隆入原