【摘 要】
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本试验将橙色指包囊菌(Dactylosporangium aurantiacum) NRRL 18085中的非达霉素生物合成基因簇与本实验室保存的德干高原游动放线菌(Actinoplanes deccanensis) SIPI-XR01的
【机 构】
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复旦大学药学院,上海200120中国医药工业研究总院上海医院工业研究院,上海201203;中国医药工业研究总院上海医院工业研究院,上海,201203;
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本试验将橙色指包囊菌(Dactylosporangium aurantiacum) NRRL 18085中的非达霉素生物合成基因簇与本实验室保存的德干高原游动放线菌(Actinoplanes deccanensis) SIPI-XR01的测序结果进行对比,找到SIPI-XR01中含有与已报道的合成基因簇中编码LuxR家族调节因子的转录激活因子tiaR1基因类似的基因片段,并将其命名为xrrl,根据该基因设计引物,并通过PCR扩增和质粒构建的方法将其整合到菌株基因组上,成功构建了过量表达xrrl工程菌,命名为SIPI-XR02.结果 表明SIPI-XR02相比SIPI-XR01产量有明显提高,经过培养基碳氮源优化后摇瓶产量最高可达4 592 μg/ml,并随后在10L发酵罐上进行验证,发酵后产量达到3 930 μg/ml,具有工业应用价值.
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