铁皮石斛野生居群研究(Ⅳ):RAPD反应体系的构建与优化

来源 :南京师大学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:echoofstar
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为获得铁皮石斛RAPD的最佳反应体系,本文对影响RAPD反应的模板含量、Mg^2+浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度、扩增程序及退火温度等多种因子进行了构建与优化.通过各因子的组合研究,我们得到铁皮石斛RAPD反应最适扩增体系是:25μIPCR反应体积,10×Buffer2.5μL,2.5mmol/LMgCl2,dNTP2.5μL(各2.5mmol/L),模板DNA为30ng,Taq聚合酶1.5U,随机引物12pmol,ddH2O14.2μL.最佳扩增程序:94℃预变性3min,94℃变性50s,
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