表达载体pEGFP-C3-PENK的构建以及在NIH3T3细胞中的表达

• 作 者: 曹靖 胡伊乐 任秀花 臧卫东
• 机 构: 郑州大学基础医学院解剖学教研室,郑州,450001河南科技大学基础医学院解剖学教研室,洛阳,471000
• 出 处: 解剖学杂志
• 发表日期: 2010年4期
• 关键词: 转基因 前脑啡肽原基因 增强型绿色荧光蛋白 真核表达
• 基金项目: 河南省教育厅科技攻关项目

目的:构建质粒pEGFP-C3-PENK,并观察其在真核细胞中表达的时效.方法:构建质粒pEGFP-C3-PENK;低浓度裸质粒、高浓度裸质粒、脂质体介导分别转染NIH3T3细胞,观察转染率、绿色荧光蛋白表达情况;放射免疫法和免疫细胞化学法检测脑啡肽的表达情况.结果:质粒pEGFP-C3-PENK成功构建;低浓度裸质粒转染率5%;高浓度裸质粒转染率8%,脂质体介导转染率为20%;转染5周后仍有绿色荧光蛋白表达.结论:成功构建质粒pEGFP-C3-PENK,可在NIH3T3细胞中表达超过5周.