新型鸭细小病毒SYBR Green I荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

• 作 者: 周洁文 汤傲星 戚睿斌 朱杰 李传峰 郭鑫 刘光清
• 机 构: 中国农业大学动物医学院,中国农业科学院上海兽医研究所
• 出 处: 中国动物传染病学报
• 发表日期: 2020年4期
• 关键词: 新型鸭细小病毒 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR 普通PCR Novel duck parvovirusSYBR Green I fluorescence
• 基金项目: 国家重点研发计划项目(2016YFD0500108,2016YFD0501003),上海市科技兴农创新项目(沪农科创字(2019)第3-3号),中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2019JB06)

本研究以新型鸭细小病毒VP3基因保守区域克隆至pMD19-T载体上获得的阳性质粒作为标准阳性质粒,建立一种检测新型鸭细小病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。结果显示:在5.17×10^1~5.17×10^7拷贝数呈良好的线性关系,相关系数R~2为0.999、斜率为3.595,灵敏度可达到5.17拷贝数;该方法用于检测鸭常见传染病呼肠孤(DRV)、禽流感(AIV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)、鸭病毒性肝炎(DHV)、鸭星状病毒(DAstV)无非特异性扩增,特异性良好;对安徽、山