尼古丁促进人支气管平滑肌细胞收缩的作用机制研究

• 作 者: 洪玮 郝斌威 彭芳 彭公永 黄玲媚 徐娟 曹伟涛 廖宝玲 唐龙辉 蒲金定 李冰 冉丕鑫
• 机 构: 510120 广州医科大学 呼吸疾病国家重点实验室 广州医科大学附属第一医院,510120 广州医科大学 呼吸疾病国家重点实验室 广州医科大学附属第一医院,广州医科大学附属第三医院,510120 广州
• 出 处: 中华结核和呼吸杂志
• 发表日期: 2018年41期
• 关键词: Nicotine Receptor nicotinic Transient receptor potential channels Cell contracti

目的

探讨尼古丁促进人支气管平滑肌细胞收缩的作用机制。

方法

体外培养原代人支气管平滑肌细胞，根据细胞是否经10^－5 mol/L尼古丁处理48 h分为对照组和尼古丁组，根据转染α7烟碱样受体(nAChR) siRNA序列或siNC序列分为siNC组、siα7nAChR组、siNC＋尼古丁组和siα7nAChR＋尼古丁组。胶原凝胶收缩实验检测尼古丁对细胞收缩功能的影响；蛋白免疫印迹法检测尼古丁对人支气管平滑肌细胞α7nAChR和TRPC6蛋白表达；钙离子成像系统检测尼古丁对细胞内钙离子水平的改变。采用t检验或单因素方差分析进行统计分析。

结果

尼古丁组胶原凝胶面积为(24±8)%，明显低于对照组的(59±14)%，差异有统计学意义(t＝3.78，P<0.05)；尼古丁组α7nAChR蛋白表达为(173±16)%，明显高于对照组的(100±0)%，差异有统计学意义(t＝－6.848，P<0.05)。siNC＋尼古丁组胶原凝胶面积为(37±10)%，明显低于siNC组的(72±10)%，siNC＋尼古丁组细胞内基础钙水平(1.04±0.02)、钙库调控钙内流(SOCE)水平(0.68±0.03)及受体调控钙内流(ROCE)水平(0.36±0.02)明显高于siNC组(分别为0.79±0.07、0.41±0.04、0.17±0.02)，差异有统计学意义(均P<0.05)。siα7nAChR＋尼古丁组胶原凝胶面积为(62±10)%，明显高于siNC＋尼古丁组，siα7nAChR＋尼古丁组细胞内基础钙水平(0.78±0.06)、钙库调控钙内流(SOCE)水平(0.39±0.05)及受体调控钙内流(ROCE)水平(0.15±0.02)明显低于siNC＋尼古丁组(均P<0.05)。

结论

尼古丁可通过上调α7nAChR蛋白的表达，从而增加TRPC6蛋白的表达以及SOCE和ROCE水平，增加细胞内钙浓度，进而促进人支气管平滑肌细胞收缩。