【摘 要】
：
目的:建立丙型肝炎病毒包膜区基因的真核表达载体,并对表达产物进行鉴定,同时测定表达产物与抗HCV阳性血清的反应情况.方法:用限制性内切酶XbaⅠ和EcoRⅠ从原核表达载体pMS-C
【机 构】
：
北京医科大学人民医院肝病研究所,北京医科大学免疫学系
论文部分内容阅读
目的:建立丙型肝炎病毒包膜区基因的真核表达载体,并对表达产物进行鉴定,同时测定表达产物与抗HCV阳性血清的反应情况.方法:用限制性内切酶XbaⅠ和EcoRⅠ从原核表达载体pMS-CVE1中切下HCV E1区的基因片段,并将其克隆到真核表达载体PcDNA3.1中,阳性克隆经SmaⅠ和XbaⅠ双酶切鉴定后,用磷酸钙共沉淀法将其转染入小鼠骨髓瘤细胞SP2/0中,同时利用Western Blot方法对表达产物进行鉴定; 测定表达产物与20份抗HCV阳性血清标本和10份抗HCV阴性的血清标本的反应性.结果:经酶切过夜后从原核表达载体上切下的基因片段与经过同样双酶切的真核表达载体PcDNA3.1连接,阳性克隆经SmaⅠ和XbaⅠ酶切后产生了预期大小的354bp的片段.经磷酸钙转染,产生了具有对G418抗性的细胞克隆,经Western Blot方法用抗HCV E1区合成肽抗原的单抗检测表达产物,产生了特异的反应;并证实该表达产物与HCV患者的血清有特异反应.经Western Blot证实在抗HCV阳性血清中有35%(7/20)可与表达产物产生特异的反应;阳性细胞经3个月传代后,仍可检测到HCV E1的表达产物.结论:此项研究所建立的能够表达HCV E1基因细胞系表达产物可与阳性血清发生特异性反应,该细胞系的建立为进一步研究抗HCV E1抗体的临床意义及进行有关HCV核酸免疫的研究创造了条件.
其他文献
景观设计课程对学生职业能力培养和职业素养养成起重要作用。本文就景观设计教学方法改革,谈几点粗浅的看法,仅供大家参考。
Landscape design course plays an important r
目的：探讨一氧化碳中毒的机理及诊断，治疗方法。方法根据临床诊治的一些患者的病情资料，探讨一氧化碳中毒的后遗症及治疗结果。结果成功率95%，结论及时脱离中毒环境，吸高压氧是成
目的：对应用阿莫西林对患有消化性溃疡疾病的患者实施治疗的临床效果进行研究。方法将我院收治的92例患有消化性溃疡疾病的患者随机分为对照组和治疗组，平均每组46例。采用奥美
目的：观察普外科老年高危病患者的手术护理作用。方法选取2013年1月到2014年1月期间我院普外科收治的高危病患者99例，随机分为对照组与观察组。对照组患者50例，接受常规手术护理
技术管理工作的主要任务是运用管理的职能与科学的方法,去促进技术工作的开展.实践证明,施工技术管理工作是施工企业的重要组成部分.注重技术管理,提高管理水平对企业经营管
本文结合作者多年上网工作实践,依照相关规范,从技术的角度详细分析阐述了大型火电厂锅炉安装过程中如几何尺寸、标高、水平偏差、扭曲值等锅炉安装基本参数的检测与精度控制
本文首先对工程项目成本的定义和管理的目的进行研究,就工程项目成本的定义,分别从狭义和广义两个方面进行论述.项目成本管理的任务主要包括:成本预测、成本计划、成本控制、
女大学生人际关系对于其自身发展有着非常重要的影响，本文对女大学生人际关系现状做了问卷调查，分析了女大学生的人际交往现状，并提出了促进女大学生人际交往能力的对策与建议。
功能康复是脑瘫治疗的最终目的,由于不少脑瘫病人除了有较严重的肢体功能障碍外,还合并有不同程度的弱智、语言障碍、视听觉障碍、生长发育迟缓、癫痫和行为情绪异常等等.因
目的 :探讨上消化道术后功能异常的原因、临床表现及影像学特点。方法 :对 80例临床怀疑上消化道术后功能异常的检查结果进行回顾性分析 ,X线检查以简化气钡双重造影为主 ,所