【摘 要】
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目的 观察不同浓度雷帕霉素对大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡的影响.探讨其可能的作用机制.方法 使用不同浓度雷帕霉素(1μg/L、2μg/L、4μL/8、μg/L、16μg/L)处理大鼠肾小球系膜细胞,并设正常对照组.MTT法测不同浓度雷帕霉素干预24 h、48 h、72 h后对细胞增殖的影响,并描记生长曲线.干预72 h后.采用RT-PCR和Western印迹法分别检测各浓度雷帕霉索组细胞周期负调蛋
【机 构】
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100853北京,解放军总医院肾内科,全军肾脏病研究所暨重点实验室,100853北京,解放军总医院肾内科,全军肾脏病研究所暨重点实验室,100853北京,解放军总医院肾内科,全军肾脏病研究所暨重点实验
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目的 观察不同浓度雷帕霉素对大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡的影响.探讨其可能的作用机制.方法 使用不同浓度雷帕霉素(1μg/L、2μg/L、4μL/8、μg/L、16μg/L)处理大鼠肾小球系膜细胞,并设正常对照组.MTT法测不同浓度雷帕霉素干预24 h、48 h、72 h后对细胞增殖的影响,并描记生长曲线.干预72 h后.采用RT-PCR和Western印迹法分别检测各浓度雷帕霉索组细胞周期负调蛋白p27和p53的mRNA和蛋白表达变化;用流式细胞计量术检测各浓度雷帕霉素组细胞周期及凋亡率.结果 小剂量雷帕霉素(1 μg/L)对系膜细胞增殖即具有明显的抑制作用,停滞于G1期的细胞数明显增加,但对系膜细胞凋亡无明显影响.较大剂量雷帕霉素(8~16μg/L)能够明显增加肾小球系膜细胞凋亡.雷帕霉素能够增加肾小球系膜细胞p27、p53 mRNA和蛋门表达.且呈剂最依赖性.结论 雷帕霉素可能通过增加p27、p53表达抑制肾小球系膜细胞增殖和促进系膜细胞凋亡。
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