【摘 要】
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背景与目的:作为异染色质重要组分的染色体盒3(chromobox 3,CBX3)参与多种癌症的发生、发展过程,而CBX3基因在肺腺癌中的表达情况和作用尚不清楚.探讨CBX3在肺腺癌中的表达与肺腺癌患者预后的关系,并研究CBX3对A549肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法:下载癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)中的肺腺癌转录组数据和对应的临床数据,应用R软件分析CBX3在肺腺癌中的表达差异和免疫浸润相关性,采用受试者工作特征(receiver operatin
【机 构】
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潍坊医学院临床医学院,山东 潍坊 261053;北京大学深圳医院胸外科,广东 深圳 518036;北京大学深圳医院中心实验室,广东 深圳 518036;北京大学深圳医院胸外科,广东 深圳 518036
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背景与目的:作为异染色质重要组分的染色体盒3(chromobox 3,CBX3)参与多种癌症的发生、发展过程,而CBX3基因在肺腺癌中的表达情况和作用尚不清楚.探讨CBX3在肺腺癌中的表达与肺腺癌患者预后的关系,并研究CBX3对A549肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法:下载癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)中的肺腺癌转录组数据和对应的临床数据,应用R软件分析CBX3在肺腺癌中的表达差异和免疫浸润相关性,采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线和Kaplan-Meier分析CBX3在肺腺癌中的预后意义;收集北京大学深圳医院智能化生物样本库-80℃新鲜冻存的2020年8月—2021年1月行肺癌姑息性切除术或根治性切除术的肺腺癌样本20例(已获得知情同意),采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测20例冻存的肺腺癌组织及配对正常肺组织中CBX3的表达;应用小干扰RNA(siRNA)转染A549细胞以沉默CBX3的表达,并根据siRNA转染的类型将A549细胞分为沉默组(si-CBX3组)和阴性对照组(si-NC组),通过用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)实验、克隆形成实验、划痕实验和transwell实验分别研究CBX3对A549肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.结果:基于TCGA肺腺癌数据的差异分析与采集的肺腺样本RTFQ-PCR实验的结果显示,CBX3在肺腺癌中呈显著的高表达,差异有统计学意义(P<0.05);辅助型T细胞2的浸润与CBX3表达呈正相关,相关系数(r)=0.437,而肥大细胞(r=-0.444)、嗜酸性粒细胞(r=-0.380)等免疫细胞与CBX3表达呈负相关;ROC曲线下面积(area under curve,AUC)值为0.912,表明CBX3对肺腺癌具有很好的诊断价值,Kaplan-Meier分析结果显示,CBX3高表达组生存期更短,提示预后较差;沉默CBX3在A549细胞中的表达后,CCK-8实验和克隆形成实验结果表明,A549细胞的增殖能力显著降低(P<0.01);划痕实验结果表明沉默后的A549细胞的迁移率为(22.68±3.44)％,较阴性对照组迁移能力明显降低(P<0.05);Transwell实验结果表明A549细胞的相对侵袭率为(53.94±5.39)％,侵袭能力显著降低(P<0.01).结论:CBX3在肺腺癌中显著高表达并提示肺腺癌预后不良,可作为肺腺癌的预后标志物,且CBX3的高表达促进了A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力.
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