大蒜RAPD反应体系的建立及优化

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该试验以弥渡紫皮大蒜叶片基因组DNA为试材,采用不同浓度MgCl2、引物、dNTP、TapDNA聚合酶对大蒜的RAPD体系进行单因素反应条件优化。结果表明,25μL总反应体积中,最佳浓度配比为:模板DNA40ng。MgCl2 2.0mmoL/L,引物12pmol,dNTP50μmoL/L,Taq DNA聚合酶unit,10×反应缓冲液2.5μL。扩增程序为:94℃变性3min,94℃变性30s,37℃退火30s,72℃延伸1min,共35个循环,72℃最终延伸10min。
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