提高腺病毒表达载体扩增效率的研究

• 作 者: 崔卫刚 郭灵 曾庆堂 磨洁琳 韦力 蓝玲
• 机 构: 广西医科大学人体解剖学教研室
• 出 处: 解剖学研究
• 发表日期: 2006年2期
• 关键词: 体外扩增 腺病毒载体 Β-半乳糖苷酶 人胚肾细胞 In vitro amplificationr Adenoviral vector β-galactosi

目的探讨在体外扩增重组腺病毒表达载体的有效方法。方法用含10％胎牛血清RPMI 1640培养液常规培养人胚肾293细胞，当细胞生长至70％～80％汇合时，加入含有报告基因LacZ的重组5型腺病毒载体（Ad5CMVLacZ）共同培养36～38h。用X-gal组织化学方法检测Ad5CMVLacZ转染和表达的程度。结果293细胞生长至70％～80％汇合时，分裂增殖旺盛，形态为梭形、多角形，有明显分裂相，为指数生长期细胞。加入Ad5CMVLacZ 8h后，293细胞开始出现肿胀，细胞间联系疏松，36～48h后细胞