瑞士乳杆菌X-脯氨酰-二肽酰基-氨基肽酶的分离纯化及酶学性质

• 作 者: 郭宇星 祝倩 朱坤 周慧敏 孙杨赢 曾小群 潘道东
• 机 构: 南京师范大学金陵女子学院,宁波大学海洋学院
• 出 处: 食品科学
• 发表日期: 2013年17期
• 关键词: X-脯氨酰-二肽酰基-氨基肽酶(Pep-X) 纯化 酶学性质 X-prolyl dipeptidyl aminopeptidase （Pep X） purifi
• 基金项目: 国家自然科学基金青年科学基金项目（31101314）,江苏省自然科学基金项目（BK2011787）,江苏省高校自然科学基金项目（13KIB550013）,南京师范大学特聘教授、高层次人才科研启动基金项目（184070H2808）,浙江省自然科学基金项目（LQ12C20003）,宁波市科技局创新基金项目（2010C192024）,宁波市自然科学基金项目（2012A610145）

提取并纯化瑞士乳杆菌X-脯氨酰-二肽酰基-氨基肽酶（Pep X），并对其酶学性质进行研究。采用超声波破碎瑞士乳杆菌菌体获得含有Pep X的粗酶液，粗酶液经过硫酸铵沉淀、Sephacryl S-300 HR层析、非变性-聚丙烯酰胺凝胶电泳法切胶回收蛋白纯化瑞士乳杆菌Pep X。纯化后Pep X经SDS-PAGE测定分子质量并研究酶学性质。得到电泳纯的Pep X，酶比活力62.24U/mg，单体分子质量大约26kD，最适酶反应pH7.0，最适酶反应温度37℃。Co2＋对Pep X有激活作用，Zn2＋、Ni2＋