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目的:
进一步纯化及获得能促进周围神经损伤修复的雪旺细胞源营养蛋白。
方法:收集预损伤大鼠坐骨神经200条,用酶消法结合差速粘附法纯化并收集其中雪旺细胞,将细胞超声粉碎、离心,收集上清超滤,再经Sephadex G-100层析,得到两个主峰,分段收集,将其中活性部分过高效液相色谱柱。
结果:得到三个主峰,分子量分别为68 kD、54 kD和30 kD,用MTT法测定生物活性,54 kD蛋白生物活性最大,经SDS-PAGE电泳证实基本为单一蛋白带。
结论:应用三步法同时各步骤采用合适方案能较好地纯化和获得具有良好促神经生长活性的雪旺细胞源营养蛋白。