环状RNA-102231增加结肠癌HT-29细胞对顺铂耐药性的作用及其机制

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目的:探讨环状RNA-102231(circRNA-102231)增加结肠癌HT-29细胞对顺铂耐药性的作用及其机制。方法:用Western blot和RT-qPCR检测顺铂耐药的HT-29/DDP细胞株circRNA-102231和ABCB1的表达水平;在HT-29细胞中分别过表达或敲降circRNA-102231后加入不同浓度的顺铂,用CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测ABCB1蛋白的表达水平,RT-qPCR检测circRNA-102231和ABCB1的mRNA表达水平;用数据库预测并验证与circRNA-102231相结合的microRNA;激活或抑制ERK的同时过表达miR-145,Western blot和RT-qPCR检测ABCB1的蛋白和mRNA表达水平,荧光素酶报告基因检测ABCB1启动子活性。结果:与HT-29细胞相比,HT-29/DDP细胞中circRNA-102231和ABCB1的表达水平均显著上调(均n P<0.05);过表达circRNA-102231能显著上调ABCB1的表达水平,降低细胞对顺铂的敏感性(n P<0.05);敲降circRNA-102231能下调ABCB1的表达水平,增加细胞对顺铂的敏感性(n P<0.05);circRNA-102231可以招募miR-145并能够促进其表达;miR-145能促进ERK磷酸化,激活或抑制ERK活性能够促进或上调ABCB1的表达水平和启动子活性(n P<0.05)。n 结论:circRNA-102231可能通过miR-145/ERK通路上调ABCB1的表达并提高HT-29细胞对顺铂的耐药性。
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