【摘 要】
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采用正交实验设计,对影响土壤微生物RAPD扩增体系的Mg2+、dNTP浓度及引物浓度进行了研究,同时对退火温度、延伸时间及循环次数进行摸索.结果表明,适宜土壤微生物PCR扩增反应
【机 构】
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东北农业大学园艺系,建三江大兴农场
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采用正交实验设计,对影响土壤微生物RAPD扩增体系的Mg2+、dNTP浓度及引物浓度进行了研究,同时对退火温度、延伸时间及循环次数进行摸索.结果表明,适宜土壤微生物PCR扩增反应在25 μ1体积中进行,包括7 ng土壤微生物DNA样品、20 pm随机引物、1.5 u Taq酶、3.0 mmo·L-1 MgCL2和0.2 mmo1·L-1dNTP.PCR扩增反应进程如下:94℃3 min,使土壤DNA变性;然后再进行39个循环,每个循环包括94℃1 min,37℃40 s,72℃90 s
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