【摘 要】
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目的：为简化PCR产物真核表达载体构建步骤,构建真核表达型T载体,并对其特性及表达效率进行分析。方法：限制性内切酶EcoRV酶切真核表达载体pcDNA3,回收线性化质粒片段与dTTP70℃
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院病毒研究室
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目的：为简化PCR产物真核表达载体构建步骤,构建真核表达型T载体,并对其特性及表达效率进行分析。方法：限制性内切酶EcoRV酶切真核表达载体pcDNA3,回收线性化质粒片段与dTTP70℃退火,构成T克隆载体并回收纯化。将增强绿色荧光蛋白基因（EGFP）和中国旱獭α干扰素基因（cwIFNA5）分别扩增后直接克隆到新构建的表达型T载体,转化感受态细菌,挑选阳性菌并制备质粒瞬时转染真核细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达,病毒保护试验检测中国旱獭α干扰素的生物学活性。结果：外源基因EGFP和cwIFNA5克隆进
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