【摘 要】
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目的 探讨无关第三方耐受型树突细胞(tDC)的生物学特性及其对急性移植物抗宿主病(aGVHD)的预防作用.方法 用GM-CSF、IL-10和TGF-β1诱导培养D1小鼠骨髓源tDC,用流式细胞术检
【机 构】
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华东师范大学生命科学学院上海市血液中心研究生联合培养基地,上海市血液中心输血研究所
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目的 探讨无关第三方耐受型树突细胞(tDC)的生物学特性及其对急性移植物抗宿主病(aGVHD)的预防作用.方法 用GM-CSF、IL-10和TGF-β1诱导培养D1小鼠骨髓源tDC,用流式细胞术检测细胞表型,用RT-PCR方法检测细胞因子基因表达情况.采用混合淋巴细胞反应法检测其体外对异基因小鼠CD4+T细胞增殖的影响;将D1小鼠骨髓源tDC按不同剂量分组输注给aGVHD小鼠模型(B6→D2),观察受鼠一般状况、生存率、临床GVHD评分、血清中Th1/Th2细胞因子水平的变化,并以单纯aGVHD模型为对照组进行比较.结果 流式细胞术检测结果表明tDC表达低水平的MHC Ⅱ分子(I-A/I-E)和共刺激分子(CD80、CD86、CD40).RT-PCR结果表明,tDC低水平表达炎性细胞因子IL-12p40,但高水平表达免疫抑制性因子IL-10、TGF-β、FasL、IDO和精氨酸酶.无关第三方tDC在体外能够有效抑制异基因CD4+T细胞的增殖,并且这种抑制效应与tDC的剂量有关;小鼠体内实验显示,aGVHD对照组小鼠在移植后18 d内全部死亡;而接受无关第三方tDC输注组小鼠aGVHD症状均有所改善,其中输注104 tDC的受鼠有60%能存活至60 d以上,无明显的GVHD症状.而输注103 tDC的小鼠仅有20%能存活至移植后第60天,输注105 tDC的小鼠则在移植后37 d内全部死亡.移植21 d时,输注103、104、105无关第三方tDC的小鼠血清内IL-10水平分别为(114.23±7.78)、(646.18±212.02)、(121.97±10.47)ng/L,104 tDC组显著高于其他组(P
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