旋毛虫新生幼虫期特异性T314全长cDNA的克隆及表达

• 作 者: 吴秀萍 刘明远 陈启军 卢强 付宝权 姚春雨 P.Boire
• 机 构: 解放军军需大学军事兽医系,瑞典微生物与肿瘤生物学研究中心,解放军军需大学军事兽医系,法国食品卫生安全局
• 出 处: 中国兽医学报
• 发表日期: 2003年2期
• 关键词: 新生幼虫 旋毛虫 T314cDNA 基因克隆 基因表达 特异性基因 Trichinella spiralis T314 cDNA cloning expr
• 基金项目: 国家自然科学基金，军队科研项目

利用PCR将旋毛虫新生幼虫期特异性全长T314cDNA的信号肽祛除后重组到原核表达载体pET-28a.将重组质粒pET28-T314转入克隆菌DH5α和表达菌DE3,分别提取质粒进行酶切、测序鉴定.用IPTG诱导培养重组表达菌DE3,做菌体裂解物外源基因表达产物的SDS-PAGE分析.将重组质粒表达的融合蛋白免疫家兔制备抗血清,采用Western blot检测T314cDNA在旋毛虫不同发育时期的表达情况及其天然表达产物的相对分子质量.测序结果显示:外源T314cDNA的PCR产物在重组质粒pET28-T