【摘 要】
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目的 探讨酸枣仁-延胡索配伍对肝郁型失眠小鼠的镇静催眠作用及机制.方法 ①将96只昆明小鼠随机分为4组:正常组、酸枣仁组(2.25 g·kg-1)、延胡索组(1.50 g·kg-1)、酸枣仁-延胡索配伍组(简称配伍组,3.75 g·kg-1),每组24只;每日1次,连续灌胃10d,然后观察戊巴比妥钠阈下剂量(腹腔注射,35 mg·kg-1)诱导小鼠的睡眠发生率,阈上剂量(腹腔注射,45 mg·kg-1)诱导小鼠的睡眠潜伏期、睡眠时间.②将60只昆明小鼠随机分为5组:正常组、模型组、酸枣仁组(2.25 g·
【机 构】
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河北中医学院药学院,河北省高校中药组方制剂应用技术研发中心,河北石家庄050091
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目的 探讨酸枣仁-延胡索配伍对肝郁型失眠小鼠的镇静催眠作用及机制.方法 ①将96只昆明小鼠随机分为4组:正常组、酸枣仁组(2.25 g·kg-1)、延胡索组(1.50 g·kg-1)、酸枣仁-延胡索配伍组(简称配伍组,3.75 g·kg-1),每组24只;每日1次,连续灌胃10d,然后观察戊巴比妥钠阈下剂量(腹腔注射,35 mg·kg-1)诱导小鼠的睡眠发生率,阈上剂量(腹腔注射,45 mg·kg-1)诱导小鼠的睡眠潜伏期、睡眠时间.②将60只昆明小鼠随机分为5组:正常组、模型组、酸枣仁组(2.25 g·kg-1)、延胡索组(1.50 g·kg-1)、配伍组(3.75 g·kg-1),每组12只.采用慢性夹尾刺激和对氯苯丙氨酸(PCPA,400 mg·kg-1)腹腔注射的复合因子造模法复制肝郁型失眠小鼠模型.每日1次,连续灌胃给药14 d.采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)的含量,检测垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)及下丘脑促肾上腺皮质激素释放素(CRH)的含量;采用免疫组化法检测垂体ACTH和海马5-HT的蛋白表达;采用qRT-PCR法检测脑组织中K+-Cl-共转运体2(KCC2)、Na+,K+-2Cl-共转运体1(NKCC1)mRNA表达水平.结果①与正常组比较,给药组小鼠的睡眠发生率明显提高,睡眠时间显著延长(P＜0.01);酸枣仁组及配伍组的睡眠潜伏期显著缩短(P＜0.01).②与正常组比较,模型组小鼠血清的NE、DA含量明显升高(P＜0.05,P＜0.01),5-HT含量明显降低(P＜0.01);脑垂体ACTH及下丘脑CRH含量明显升高(P＜0.01);垂体中ACTH的表达明显上调(P＜0.01),海马中5-HT的表达明显下调(P＜0.01);脑组织的KCC2 mRNA表达明显下调(P＜0.01),NKCC1 mRNA表达明显上调(P＜0.01).与模型组比较,配伍组小鼠血清的NE、DA含量明显降低(P＜0.01),5-HT含量明显升高(P＜0.01);脑垂体ACTH及下丘脑CRH含量明显降低(P＜0.01);脑垂体中ACTH的表达明显下调(P＜0.01),海马中5-HT的表达明显上调(P＜0.01);脑组织的KCC2 mRNA表达明显上调(P＜0.01),NKCC1 mRNA表达明显下调(P＜0.05).结论 酸枣仁-延胡索配伍对肝郁型失眠小鼠具有镇静催眠作用,可能与其调控KCC2、NKCC1基因表达,抑制HPA轴激活,从而调节神经递质水平有关.
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