突变SOD1cDNA亚克隆入酵母穿梭表达质粒pGBKT7中

• 作 者: 陈桂生 史树贵 李露斯 陈康宁 袁顺宗 彭旭 吴军 罗高兴
• 机 构: 第三军医大学西南医院神经内科,第三军医大学西南医院烧伤研究所
• 出 处: 中国药业
• 发表日期: 2008年1期
• 关键词: 突变SOD1cDNA 亚克隆 pGBKT7 mutant SOD 1 cDNA subclone pGBKT7
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目,项目编号：30300116.

目的将突变SOD1cDNA亚克隆入酵母穿梭表达质粒pGBKT7中。方法利用PCR方法从重组子pEGFP—N2-mSOD1中扩增突变的SOD1cDNA片断。以EcoRⅠ／salⅠ双酶切突变SOD1cDNA片断和酵母穿梭表达质粒pGBKT7，在T4DNA连接酶的作用下，连接突变SOD1cDNA片断和酵母穿梭表达质粒pGBKT7。转化感受态DH5α，筛选重组子，进行双酶切和测序鉴定。结果经酶切和测序鉴定，突变SOD1cDNA成功地亚克隆入酵母穿梭表达质粒pGBKT7中。结论亚克隆成功，可以对目的基因进行下一步研