RECK基因GFP融合蛋白真核表达载体的构建及鉴定

• 作 者: 刘利军 扈梅 杨向明 申致远 赵伟礼 孙沫逸
• 机 构: 新疆医科大学口腔医学院,第四军医大学口腔医学院口腔颌面外科,武警新疆总队吐鲁番支队
• 出 处: 新疆医科大学学报
• 发表日期: 2014年4期
• 关键词: RECK基因 基因表达 质粒构建 RECK gene gene expression plasmid construction

目的使用真核表达载体pCDNA3．1，构建含有GFP蛋白标签的RECK真核表达载体，研究RECK基因在口腔鳞状细胞癌转移中的作用。方法使用人胚肝cDNA文库，通过聚合酶链反应扩增出带有XhoI及BamHI核酸内切酶位点的目的RECK基因序列后连接人真核载体pCDNA3．1质粒中，在RECK基因序列上游通过聚合酶链反应扩增构建GFP蛋白标签。经过DNA琼脂糖凝胶电泳检测后，将GFP蛋白标签连接人真核表达载体pCDNA—RECK中。经过测序分析比对后，转化人DH5a感受态细胞后，提取质粒。使用Lipofect