人防御素-5基因原核表达载体pRSET-A的构建

来源 :实用预防医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：AHUAYA

【摘要】

：

目的利用分子生物学技术和方法将pRSET—A质粒改建为带有人α-防御素5（HD-5α）基因的新型表达载体pRSET—HD-5α。为大量生产和提纯具有生物活性人防御素5抗菌肽的研究提供实验

【作者】

：

吴学敏李会单颖卢颖佟伟董颖

【机构】

：

辽宁医学院免疫与病原生物学教研室

【出处】

：

实用预防医学

【发表日期】

：

2008年1期

【关键词】

：

人防御素5 克隆表达载体 Human defensin- 5 Clone Expression vector

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目的利用分子生物学技术和方法将pRSET—A质粒改建为带有人α-防御素5（HD-5α）基因的新型表达载体pRSET—HD-5α。为大量生产和提纯具有生物活性人防御素5抗菌肽的研究提供实验基础。方法PCR技术，以设计的引物P1／P2从cDNA文库中扩增人α-防御素5基因片段，并将扩增出来的目的基因和pRSET—A质粒用BamHI和EcoRI双酶切后连接构成重组质粒，然后转化大肠杆菌DH-5α，筛选阳性克隆。最后对PCR及酶切鉴定含有目的基因的克隆进行测序和电泳。结果获得α-防御素-5基因片断大小正确，经测序

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