【摘 要】
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目的 对斯氏按蚊MyD88基因进行生物信息学分析,并研究其在抗约氏疟原虫感染中的作用.方法 首先,通过VectorBase数据库获取斯氏按蚊MyD88基因cDNA序列,并利用VectorNTI、DNAMA
【机 构】
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陆军军医大学军事预防医学系热带医学教研室,重庆,400038;陆军军医大学基础医学院学员一大队2队,重庆,400038
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目的 对斯氏按蚊MyD88基因进行生物信息学分析,并研究其在抗约氏疟原虫感染中的作用.方法 首先,通过VectorBase数据库获取斯氏按蚊MyD88基因cDNA序列,并利用VectorNTI、DNAMAN等软件对MyD88基因cD-NA序列进行生物信息学分析.然后,根据MyD88的cDNA序列设计Real-time PCR引物,提取斯氏按蚊总RNA,通过反转录合成cDNA,利用Real-time PCR方法检测MyD88基因在蚊各个生活史阶段转录水平情况及其在约氏疟原虫感染后的转录水平变化.结果 斯氏按蚊MyD88基因位于斯氏按蚊KB664619号染色体155 163～158 066 bp的反义链上,包含两个外显子,其cDNA全长1 383 bp,编码460个氨基酸.系统发育树结果显示,斯氏按蚊与大劣按蚊和冈比亚按蚊系统发育的距离近,其氨基酸序列同源性达79％.对斯氏按蚊各时期MyD88基因转录水平的研究结果显示,吸食正常血和感染血均能够上调MyD88的转录,吸血后3d和5d吸感染血组MyD88基因转录水平上调明显,显著高于正常血组和未吸血组.结论 本研究证实了Toll信号通路中的MyD88基因在蚊抗疟原虫感染的天然免疫中发挥了重要作用,在感染后3d时作用明显.
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