Pdx-1、Ngn3联合MafA诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞

• 作 者: 闫淑芳 袁慧娟 刘宏霞 杜少斐 吴敬 张会峰 马跃华 赵志刚
• 机 构: 450003 郑州大学人民医院（河南省人民医院）内分泌科,450003 郑州大学人民医院（河南省人民医院）内分泌科,450003 郑州大学人民医院（河南省人民医院）内分泌科,郑州市第一人民医院内科,商
• 出 处: 中华内分泌代谢杂志
• 发表日期: 2015年31期
• 关键词: 胰十二指肠同源盒1 神经元素3 V型肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源基因A 大鼠骨髓间充质干细胞 胰岛样细胞

目的

探讨胰十二指肠同源盒1(pancreatic and duodenal homeobox 1, Pdx-1)、神经元素3(neurogenin 3, Ngn3)联合V型肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源基因A(v-maf muscu-loaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A, MafA)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSC)分化为胰岛样细胞(insulin-producing cells, IPC)的机制。

方法

通过贴壁培养法纯化BMSC，分为4组(A：未感染组；B：MafA感染组；C：Pdx-1-Ngn3感染组；D：联合感染组)，高糖条件下培养7 d,荧光显微镜观察其感染效率。Western印迹检测各组细胞Pdx-1、Ngn3和MafA表达情况，RT-PCR检测各组胰岛素2、葡萄糖激酶、巢蛋白、胰升糖素及Pdx-1表达水平，ELISA法检测各组胰岛素分泌情况。

结果

分离的细胞表面高表达CD44、CD105，而低表达CD34。诱导过程中各感染组BMSC逐渐聚集并形成细胞团块，双硫棕染色呈红棕色；各组在感染第0、3、5、7、9天胰岛素分泌水平逐渐提高，且联合感染组升高最为明显(P<0.05)；与A组相比，B、C和D组Pdx-1、胰岛素2、胰升糖素及葡萄糖激酶基因表达明显上调(P<0.05)；与B组相比，C组Pdx-1表达上调，D组Pdx-1和胰岛素2表达上调，胰升糖素表达下调(P<0.05)；与C组相比，D组胰升糖素表达上调(P<0.05)。

结论

Pdx-1、Ngn3联合MafA共同感染BMSC可分化为IPC。