【摘 要】
：
目的克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制。方法PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-3
【机 构】
：
苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室,遵义医学院珠海校区免疫学教研室
论文部分内容阅读
目的克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制。方法PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-31基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,进行PCR和双酶切鉴定,并进行序列测定。将重组质粒转染CHO细胞,用RT-PCR和Western blot分析rhIL-31在CHO细胞中的表达。用Ni2+树脂纯化his融合蛋白,用不同剂量rhIL-31刺激HaCaT细胞,利用Transwell穿孔板检测HaCaT细胞培养上清对外周血单个核细胞的趋化作用,荧光定量PCR检测rhIL-31对HaCaT表达趋化因子的影响,Western blot检测STAT3磷酸化。结果成功获得全长人IL-31基因,测序正确,经双酶切、PCR和序列测定鉴定,真核表达质粒构建正确,可在CHO细胞中表达;该目的蛋白刺激人表皮角化细胞HaCaT,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞表达趋化因子MDC、TARC、I-309;细胞STAT3磷酸化增加。结论IL-31作用于正常人表皮角化细胞,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞趋化因子表达增加,细胞STAT3磷酸化增加,提示IL-31可通过STAT3发挥作用。
其他文献
六安是革命老区,享有"红军故乡、将军摇篮"之盛名。建国后,六安人民在计划经济时代以饱满的政治热情建设自己的家乡,留下了五大水库、淠史杭工程、"三线"企业及许世友将军建
合理开发利用小学美术教材资源，对丰富教学内容和教学手段有重要意义。教材是教学的重要依据和参考，值得美术教师积极探索。教师在确定教学方向后，围绕教材拓展教学空间，让学生有
为了考察城市产生和演化背后的原因和机制,本文构建了一个新经济地理分析框架,对城市集聚进行理论研究,并以中国数据作为经验支撑。其中综合运用了区位和社会空间辩证分析方
现今中国的普通高校公共美术课程设置日趋完善,但教材的编制需要充实和完善,本文针对此问题,提出优化普通高校公共美术课教材编制几方面的建议。
在对"杀父娶母"这一文学原型进行溯源的同时,结合对采用了这一叙事模式的电影《夜宴》和《满城尽带黄金甲》等的分析后认为,如果我们的文学创作对一个文学原型只是从叙事模式
阿糖腺苷属于核苷类抗病毒药物,具有广谱的抗病毒作用,临床上已广泛用于治疗疱疹病毒、巨细胞病毒以及乙型肝炎病毒引起的疾病。本研究通过微生物发酵法制得阿糖腺苷,并采用
6月17日，陕西师范大学、长安大学研究生院成立暨揭牌仪式在西安曲江宾馆隆重举行。陕西省副省长朱静芝，国务院学位委员会办公室常务副主任、教育部学位管理与研究生教育司司长
晚餐后8点的微信空间里,一群幼师这样聊着：“晚上好.亲们,我课题报告写不出啊!”“亲们,我早上7：30到园,目前是加班模式……”“幼儿教师,不是加班,就是受气!除了受领导的气,还
本文分为七部分，第一部分对生物无机化学学科发展进行历史回顾；第二部分从回顾史实中用实例表明生物无机化学的研究始终瞄准金属离子和生物配体控制生命过程中的化学问题；第三部
本文以一种基于RF的无线数据采集系统研制过程为主要内容,详细阐述了利用无线收发芯片nRF2401设计的数据采集系统的设计流程、开发方法和开发过程,给出了具体的实现方案并对