【摘 要】
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目的:建立遗传上稳定的、带有乙型肝炎病毒(HBV)ayw亚型的转基因小鼠品系。方法:通过对受精卵显微注射进行基因转移的途径制备转基因小鼠,以PCR-Southern杂交、ELISA、组织切片免疫组化和透射电镜等方法,分
【机 构】
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第二军医大学基础医学部生物学教研室和医学分子遗传学开放实验室,第二军医大学基础医学部病理解剖学教研室,第二军医大学实验动物中心
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目的:建立遗传上稳定的、带有乙型肝炎病毒(HBV)ayw亚型的转基因小鼠品系。方法:通过对受精卵显微注射进行基因转移的途径制备转基因小鼠,以PCR-Southern杂交、ELISA、组织切片免疫组化和透射电镜等方法,分析所导入DNA在转基因小鼠体内的功能情况。结果:得到21只建立者小鼠,在它们的血清中检测到了HBsAg和HBeAg的存在,还在肝细胞中观察到了HBV样病毒颗粒。结论:HBV基因组DNA已经整合至小鼠的基因组,其中的基因能够表达,整个基因组DNA还能复制,并被有效地包装。
Objective: To establish a genetically stable transgenic mouse strain with hepatitis A virus (HBV) ayw subtype. Methods: Transgenic mice were prepared by microinjection of zygotes for gene transfer. PCR-Southern hybridization, ELISA, histological sections and transmission electron microscopy were used to analyze the function of the introduced DNA in transgenic mice . Results: Twenty-one founder mice were obtained, the presence of HBsAg and HBeAg was detected in their sera, and HBV-like virus particles were also observed in hepatocytes. Conclusion: HBV genomic DNA has been integrated into the mouse genome, where the gene is expressed, the entire genomic DNA is replicated and effectively packaged.
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