【摘 要】
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目的探讨生存素短发夹RNA-腺瘤性结肠息肉病(Survivin shRNA-APC)双基因共表达稳转株对HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤组织细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki-67表达的影响。方
【机 构】
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佳木斯大学附属第一医院; 佳木斯大学临床医学院;
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目的探讨生存素短发夹RNA-腺瘤性结肠息肉病(Survivin shRNA-APC)双基因共表达稳转株对HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤组织细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki-67表达的影响。方法将30只SPF级裸鼠随机分为5组,为Survivin shRNA-APC双基因组、Survivin shRNA及APC单基因组、空载组和阴性对照组,对各组稳转株及HT-29结肠癌细胞分别进行培养,PBS重悬使癌细胞浓度达到2×10~6/ml,于每只裸鼠右前腋下分别接种相对应的细胞悬液,构建移植瘤模型,每6天测量移植瘤体积,待7周后统一处死所有裸鼠,剥离移植瘤,将瘤体组织用多聚甲醛固定,石蜡包埋切片,根据免疫组化检测人HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤组织细胞中PCNA、Ki-67表达。结果免疫组化结果显示,Ki-67蛋白及PCNA蛋白主要定位于移植瘤组织细胞的胞核内;在阴性对照组和空载组均可见较多棕黄色或棕褐色颗粒,双基因组细胞内可见极少量黄色或淡黄色细颗粒,APC组及Survivin shRNA组染色程度介于二者之间。APC组、Survivin shRNA组、双基因组PCNA、Ki-67蛋白表达积分分别低于阴性对照组及空载组(P<0.01);双基因组PCNA、Ki-67蛋白表达积分分别低于APC组、Survivin shRNA组(P<0.01);阴性对照组与空载组比较、APC组与Survivin shRNA组比较,PCNA、Ki-67蛋白表达积分差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Survivin shRNA-APC双基因共表达稳转株可通过下调HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤组织细胞中PCNA、Ki-67的表达,抑制移植瘤细胞增殖,其效果较单基因稳转株更为显著。
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