【摘 要】
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目的:构建表达致病性赖型017株钩端螺旋体OmpL1外膜蛋白的真核-原核穿梭表达载体,并在原核细胞中表达出目的蛋白.方法:用PCR方法从017株钩体基因组中钓出OmpL1蛋白基因,酶切
【机 构】
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华西医科大学病理生理学教研室感染免疫研究室四川成都610041
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目的:构建表达致病性赖型017株钩端螺旋体OmpL1外膜蛋白的真核-原核穿梭表达载体,并在原核细胞中表达出目的蛋白.方法:用PCR方法从017株钩体基因组中钓出OmpL1蛋白基因,酶切纯化后与质粒pBK-CMV连接,通过电泳、限制性内切酶分析及PCR鉴定筛选出正确重组质粒.重组质粒在大肠杆菌中诱导表达后提取总蛋白以SDS-PAGE检测表达情况,同时监测目的蛋白表达前后各时段宿主菌OD600值的变化.结果:筛选出5株带重组质粒菌,其中有4株能在大肠杆菌中表达37 kD的特异蛋白,而且随着该外源蛋白的表达,宿
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