【摘 要】
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目的:探讨中药单体重楼皂苷Ⅰ抑制肝癌细胞生长和增殖的分子作用机制.方法:采用MTT和EDU法检测肝癌Bel-7402细胞的生长和增殖情况;Western Blot法检测Bel-7402细胞中肿瘤相关特异蛋白1(Sp1)和胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)的表达水平;采用细胞瞬间转染技术将Sp1过表达质粒或IGFBP1 siRNA转染至细胞;双荧光素酶基因报告系统检测IGFBP1启动子活性.结果:MTT结果发现PPI处理肝癌Bel-7402细胞24、48、72h后,显著抑制细胞的生长,且呈时间和剂量
【机 构】
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广州中医药大学第二临床医学院/广东省中医院,广州510006;广州中医药大学第二临床医学院/广东省中医院,广州510006;广东省中医院芳村分院肿瘤科,广州510370
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目的:探讨中药单体重楼皂苷Ⅰ抑制肝癌细胞生长和增殖的分子作用机制.方法:采用MTT和EDU法检测肝癌Bel-7402细胞的生长和增殖情况;Western Blot法检测Bel-7402细胞中肿瘤相关特异蛋白1(Sp1)和胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)的表达水平;采用细胞瞬间转染技术将Sp1过表达质粒或IGFBP1 siRNA转染至细胞;双荧光素酶基因报告系统检测IGFBP1启动子活性.结果:MTT结果发现PPI处理肝癌Bel-7402细胞24、48、72h后,显著抑制细胞的生长,且呈时间和剂量依赖关系;EDU实验结果显示PPI可显著抑制Bel-7402细胞的增殖(P＜0.05);双荧光素酶检测结果表明PPI显著上调Bel-7402细胞中IGFBP1启动子活性(P＜0.05);Western Blot结果证实,PPI显著下调Sp1蛋白表达水平(P＜0.05),上调IGFBP1蛋白表达水平(P＜0.05),过表达Sp1可阻断PPI对IGFBP1的上调作用(P＜0.05),siRNA沉默IGFBP1有效逆转PPI对肝癌Bel-7402细胞的生长抑制作用(P＜0.05).结论:IGFBP1可能是PPI抑制肝癌Bel-7402细胞生长和增殖的关键靶蛋白,PPI通过调控Sp1/IGFBP1信号通路抑制肝癌Bel-7402细胞的生长和增殖.
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