【摘 要】
：
目的 分析日本血吸虫核苷酸交换因子(SjGrpE)蛋白生物学特性,表达与纯化重组SjGrpE蛋白并测定其免疫原性.方法 采用生物信息学方法预测SjGrpE蛋白的氨基酸组成、分子量、亲/
【机 构】
：
邵阳学院病原生物学教研室 邵阳422600;湖南省邵阳市武冈市展辉医院
论文部分内容阅读
目的 分析日本血吸虫核苷酸交换因子(SjGrpE)蛋白生物学特性,表达与纯化重组SjGrpE蛋白并测定其免疫原性.方法 采用生物信息学方法预测SjGrpE蛋白的氨基酸组成、分子量、亲/疏水性、跨膜区、信号肽、定位、磷酸化位点、泛素化位点、糖基化位点、二级和三级结构及B细胞表位.以日本血吸虫cDNA为模板,PCR扩增SjGrpE基因,将其双酶切后连接到pET28a载体得到重组质粒pET28a-SjGrpE.将pET28a-SjGrpE转化大肠埃希菌BL21,用IPTG诱导目的蛋白表达,并用镍离子亲和层析法纯化蛋白.将重组SjGrpE蛋白免疫小鼠,分离血清并鉴定获得的抗多克隆抗体.结果 SjGrpE蛋白分子量约为24.3 kDa,是一种亲水性蛋白,无跨膜区、无信号肽,定位在线粒体;该蛋白含有18个磷酸化位点和2个泛素化位点,无糖基化位点,含有5个B细胞表位.SjGrpE基因全长为660 bp,成功构建重组质粒pET28a-SjGrpE并纯化获得重组SjGrpE蛋白.重组SjGrpE蛋白能够刺激小鼠分泌高滴度抗体.结论 成功制备重组SjGrpE蛋白,该蛋白具有良好免疫原性,为后续研究其作为日本血吸虫病疫苗候选分子的价值奠定了基础.
其他文献
本文采用差热分析(DTA)和核磁共振(NMR)对β-环糊精包合物进行研究,从体系焓变和质子化学位移的不同层面,探讨了有关实验现象,阐述了其成因,确认了包合物的形成.
本文描述了尿酸的检测在涉及临床诊断研究方面具有重要意义.尿酸常用的检测方法有:酶法、伏安法、毛细管电泳法、高效液相色谱法和同位素稀释质谱法等.本文比较全面的总结了
本文研究了一种基于近红外光谱分析技术奶粉中蛋白质快速检测的方法,探讨了波长选择方法,给出了波长选择的结果.
本文简单介绍近年来我国各个行收中近红外光谱分析技术的应用。如农产品中的谷物产品检验、奶制品的成分检测。
本文提出了用空气-乙炔火焰原子吸收光谱法快速测定纯镍中镁、锰、铁含量,介绍了镁、锰、铁最佳测定条件及呈良好线性范围的浓度,在测定中对样品中的干扰因素进行了综合考虑.
编辑观点朗琴X7率先运用双音圈技术,别看音箱很小巧,音质可不俗体验感受设计巧妙功能实用朗琴X7的整体设计风格偏向于简约,简洁的线条配合大块面的金属网罩的不对称设计使得
目的 建立一种可用于曼氏血吸虫特异性基因片段检测的重组酶介导的核酸等温扩增方法(Recombinase-aided amplification, RAA).方法 以曼氏血吸虫121 bp高重复基因片段作为靶
目的 建立一种基于重组酶介导等温扩增技术(RAA)的细粒棘球绦虫核酸检测方法.方法 针对细粒棘球绦虫12S rRNA基因序列片段,设计、筛选并合成RAA特异性扩增引物和荧光检测探针
目的 建立基于重组酶介导的等温扩增技术(RAA)的蓝氏贾第鞭毛虫核酸检测方法,并评价其检测敏感性和特异性.方法 选择蓝氏贾第鞭毛虫β-贾第素(β-giardin)基因作为检测靶基因
应用金属原位统计分布分析技术研究了40Cr连铸方坯中C、S、P、Si、Mh和Al的宏观偏析规律.研究表明在较高的等轴晶率下中间包钢水过热度对C的宏观偏析不产生影响.但对S和P的宏