改进的锚定反转录PCR法克隆中国人庚型肝炎病毒3‘末端基因

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应用改进的锚定反转录PCR(anchoredRT-PCR)法,在总RNA的3′端“加尾”,Oligotex提纯poly(A)+mRNA,Oligod(T)-anchor引物合成第1链cDNA,anchor引物及特异引物进行“半巢式”PCR,从献血员血清中扩增出HGV3′末端基因片段。序列分析结果表明:此中国株HGV3′末端基因序列与美国株存在较大差异,但阅读框架相似。用此方法克隆单链RNA病毒基因组的3′末端。由于许多动物病毒和90%以上的植物病毒均为单链RNA基因组,故该技术也可应用于其它病毒基因组未知
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