亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒核酸检测标准物质的制备研究

• 作 者: 吴亚琼 高志强 吴延功 张鹤晓 乔彩霞 张利峰 单虎 尹燕博
• 机 构: 青岛农业大学动物科技学院,北京出入境检验检疫局,中国动物卫生与流行病学中心,山东农业大学动物科技学院
• 出 处: 中国兽医杂志
• 发表日期: 2012年8期
• 关键词: 口蹄疫病毒 亚洲Ⅰ型 核酸扩增 标准物质 foot-and-mouth disease virus type Asia-l nucleic acid ampli
• 基金项目: 国家科技基础性工作专项项目（2008FY130100）

针对目前口蹄疫病毒核酸扩增检测缺乏标准物质的现状,以口蹄疫病毒亚洲Ⅰ型核酸为模板,分别设计引物扩增具有检测意义的5′端1nt～2208nt的片段（含完整的5′NCR）和3012nt～5155nt片段（含完整1D～2B区域）,并克隆于pMD20-T。测序后采用体外转录方法制备2种RNA纯品,进行初步定量稀释后等量混合分装。采用荧光定量RT-PCR方法进行均匀性和稳定性检验后,委托外部实验室对RNA片段进行拷贝数定值。结果显示,制备的标准品均匀性和稳定性良好。