用人源肠毒素性大肠杆菌CS3菌毛构建新型呈现载体

• 作 者: 高荣凯 张兆山 李淑琴 黄翠芬
• 机 构: 军事医学科学院生物工程研究所基因工程研究室,军事医学科学院生物工程研究所基因工程研究室
• 出 处: 遗传学报
• 发表日期: 2001年10期
• 关键词: 表面呈现 载体 CS3菌毛 人源肠毒素性大肠杆菌 surface display vector CS3 fimbriae ETEC
• 基金项目: 国家高技术研究发展计划(863计划)，国际自然科学基金

根据对人源大肠杆菌菌毛CS3亚单位亲水性、表位、二级结构和柔韧性计算机预测结果,以CS3亚单位第72位氨基酸残基之后作为外源表位的插入位点,构建了一种新的表面呈现载体pCSX72.用该载体分别表达口蹄疫病毒(FMDV)的VP1表位和C-myc的十肽表位(410～419aa).SDS-PAGE结果以及电镜和免疫电镜观察证明,插入的外源表位和CS3亚单位以杂合菌毛的形式呈现在菌体表面.ELISA检测结果表明,pCSX72表达的杂合蛋白的抗原性较之其他插入位点的载体要高得多.用重组细菌腹腔免疫小鼠,能够诱发机体