DOC-1R基因表达载体的构建及其重组蛋白的表达纯化

• 作 者: 刘杏 刘琦 王述森 高锦兰 罗阳
• 机 构: 中国医科大学医学基因组学教研室卫生部细胞生物学重点实验室,中国医科大学生物科学与生物技术（医学）系
• 出 处: 医学分子生物学杂志
• 发表日期: 2009年6期
• 关键词: DOC-1R 基因表达 基因克隆 融合蛋白 DOC-1R gene expression gene cloning fusion protein
• 基金项目: 辽宁省教育厅重点实验室项目（No：20060908）,创新团队项目（No：2008T194）

目的构建DOC-1R（deleted in oral cancer-1related）的原核表达载体并且纯化其重组蛋白，用于进-步研究DOC-1R蛋白的结构与功能。方法采用基因重组技术构建原核表达载体pGEX—DOC-1R，经DNA测序鉴定后，转化E．coliB[21，IFFG诱导表达并纯化融合蛋白。结果以菌落PCR及限制性内切酶酶切鉴定得到候选阳性克隆，测序结果表明所得到的克隆序列及开放阅读框架完全正确，IPTG诱导后SDS—PAGE电泳分析表明在40kD处出现特征蛋白表达带，经磁珠亲合层析后Weste