HOX转录反义RNA在胃癌组织的表达及其机制

• 作 者: 徐勇超 黄涛 唐礼恭 李星 任莹坤
• 机 构: 郑州大学附属肿瘤医院 河南省肿瘤医院普外科 450008,郑州大学附属肿瘤医院 河南省肿瘤医院肝胆胰外科 450008,郑州大学附属肿瘤医院 河南省肿瘤医院普外科 450008,郑州大学附属肿瘤医院
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2019年36期
• 关键词: 长链非编码RNA HOX转录反义RNA 胃癌 凋亡

目的

探讨HOX转录反义RNA(HOTAIR)在胃癌发病中的作用机制。

方法

选取40例胃癌患者，其中男29例，女21例，平均年龄(51.7±10.8)岁；Ⅰ期20例，Ⅱ期10例，Ⅲ期6例，Ⅳ期4例；高分化9例，中分化12例，低分化19例。收集所有患者的癌变组织和癌旁组织，实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测两种组织中长链非编码RNA(lncRNA) HOTAIR的表达水平，并对HOTAIR表达与患者临床特征的相关性进行分析；设计合成lncRNA HOTAIR小干扰RNA(siRNA)，在原代SGC-7901胃癌细胞株建立沉默模型。检测原代SGC-7901胃癌细胞中lncRNA HOTAIR的表达，流式细胞周期和细胞凋亡检测研究lncRNA HOTAIR对癌细胞增殖凋亡的影响；结合蛋白质印迹法(Western blot)和RT-qPCR技术研究其分子调控机制。应用SPSS 19.0统计软件分析。根据不同的数据类型，组间差异采用χ²检验或t检验分析，相关性采用皮尔森(Pearson’s)相关试验评价。

结果

癌组织中lncRNA HOTAIR的表达量为4.367±0.352，高于癌旁组织的0.984±0.782(P<0.05)，癌组织中lncRNA HOTAIR与肿瘤分化程度以及肿瘤分期呈正相关(r＝0.347、0.623，P<0.05)。lncRNA HOTAIR siRNA转染组与未转染组比较，G₁期细胞数升高(78.64±6.91比58.34±6.13，t＝3.806，P<0.05)，S期细胞数降低(11.93 ±2.54比31.54±3.01，t＝8.624，P<0.05)，G₂期细胞数量没有明显的变化(9.43±1.47比10.12±2.11，t＝0.645，P>0.05)。lncRNA HOTAIR siRNA转染处理细胞48 h后，lncRNA HOTAIR siRNA转染组早期凋亡细胞[(22.69±3.21)%比(10.97±1.52)%]、晚期凋亡细胞[(30.41±3.97)%比(7.40±1.71)%]、坏死细胞[(5.53±0.74)%比(3.44±0.42)%]的比率均明显高于未转染组细胞(t＝5.715、9.220、4.254，P<0.05)。转染处理后细胞中Wnt3a蛋白相对表达量明显低于未转染组水平(0.39±0.07比0.92±0.13，t＝6.217，P<0.05)。

结论

lncRNA HOTAIR在胃癌中表达上调，而抑制HOTAIR表达可以通过下调WntWnt3a蛋白表达阻遏Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的激活进而促进胃癌细胞凋亡。