【摘 要】
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本研究旨在克隆小鼠附睾基因fam12b,构建pET28（a）-fam12b-fam12b原核表达重组质粒,从大肠杆菌Rosetta（DE3）中获得融合蛋白。应用RT-PCR方法从小鼠附睾中扩增出fam12编码序列,串联
【机 构】
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西北农林科技大学动物医学院,军事医学科学院生物工程研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金（30972151）, 陕西省自然科学基金（2006C130）
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本研究旨在克隆小鼠附睾基因fam12b,构建pET28（a）-fam12b-fam12b原核表达重组质粒,从大肠杆菌Rosetta（DE3）中获得融合蛋白。应用RT-PCR方法从小鼠附睾中扩增出fam12编码序列,串联克隆至原核表达载体pET28（a）,转化大肠杆菌Rosetta（DE3）细胞,诱导表达,Ni-NTA纯化融合蛋白。结果显示,获得小鼠附睾基因fam12b,纯化后的融合蛋白经过SDS-PAGE和Western印记分析鉴定,在相对分子质量31kD处有特异的条带,并获得高纯度融合蛋白。本研究成功克
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