【摘 要】
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目的改进大鼠脑皮质星形胶质细胞体外培养方法,获得纯度较高的大鼠脑皮质星形胶质细胞。方法取出生后1d内SD大鼠大脑皮质,用机械吹打法使细胞分散制成初细胞悬液,10μm尼龙膜
【机 构】
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南方医科大学公共卫生与热带医学学院,
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目的改进大鼠脑皮质星形胶质细胞体外培养方法,获得纯度较高的大鼠脑皮质星形胶质细胞。方法取出生后1d内SD大鼠大脑皮质,用机械吹打法使细胞分散制成初细胞悬液,10μm尼龙膜过滤除去成纤维细胞后接种。待7d细胞铺满瓶底后,“十”字形震荡培养液5min后传代接种。传代2次后行GFAP免疫组化染色鉴定。结果通过微孔尼龙膜过滤和传代前“十”字形震荡培养液等操作可以得到形态典型、纯度较高的星形胶质细胞。通过纯度计算可得离体培养的星形胶质细胞的纯度平均值为95.49%(n=6)。结论改进的星形胶质细胞体外培养方法,降低了实验操作难度,方法稳定有效,得到的星形胶质细胞纯度较高。
Objective To improve the in vitro culture method of rat cerebral cortical astrocytes and to obtain rat cerebral cortical astrocytes with high purity. Methods The cerebral cortex of SD rats was taken out within 1 day after birth. The cells were dispersed and made into primary cell suspension by mechanical blowing method. Fibroblasts were inoculated by filtration on 10μm nylon membrane. After 7d cells covered the bottom of the bottle, “ten ” font shock culture medium 5min after inoculation. After 2 passages, GFAP immunohistochemical staining was performed. Results Microporous nylon membrane filtration and pre-passage “10 ” glyph shock broth and other operations can be morphologically typical, high purity astrocytes. The average purity of astrocytes cultured in vitro was 95.49% (n = 6). Conclusion The improved in vitro culture method of astrocytes can reduce the difficulty of experimental operation. The method is stable and effective, and the obtained astrocytes have high purity.
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