嗜酸氧化亚铁硫杆菌ATP硫酸化酶的表达、纯化及性质鉴定

• 作 者: 钱林 郑春丽 柳建设
• 机 构: 东华大学环境科学与工程学院
• 出 处: 生物技术通报
• 发表日期: 2012年6期
• 关键词: 嗜酸氧化亚铁硫杆菌 ATP硫酸化酶 表达 纯化 Acidithiobacillusferrooxidans ATP sulfurylase Expression
• 基金项目: 国家自然科学基金项目（50374075,41073060）,上海市重点学科资助项目（B604）,高等学校博士点专项科研基金（20100075110010）

ATP硫酸化酶是一种催化ATP和s04。反应生成腺嘌呤-5-磷酸硫酸（APS）和焦磷酸盐（PPi）的酶，它是硫酸根同化反应第一步的关键酶。以嗜酸氧化亚铁硫杆菌（A．ferrooxidans ATCC 23270）基因组为模板，用PCR扩增得到ATPS基因，并克隆到表达载体pLMl上。加入IPTG的诱导表达，用AKTA蛋白纯化仪的镍柱亲和层析纯化得到浓度和纯度都较高的ATPS蛋白。SDS-PAGE分析，证实其分子量大小为33kD，并成功的测出了其活性，比活达3．0×103U／mg。