【摘 要】
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目的:挖掘哮喘的潜在ceRNA网络并探索平喘颗粒抑制哮喘气道血管新生的机制.方法:利用GSE117038数据集,分析文件中差异表达的lncRNA和mRNA,通过比对、预测构建lncRNA-miRNA-mR
【机 构】
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黑龙江中医药大学,哈尔滨150040;黑龙江省中医药科学院南岗分院,哈尔滨150006;黑龙江中医药大学附属第一医院,哈尔滨150040
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目的:挖掘哮喘的潜在ceRNA网络并探索平喘颗粒抑制哮喘气道血管新生的机制.方法:利用GSE117038数据集,分析文件中差异表达的lncRNA和mRNA,通过比对、预测构建lncRNA-miRNA-mRNA关联,构建ceRNA调控网络.通过屋尘螨(HDM)诱导构建哮喘小鼠模型,并给予平喘颗粒灌胃治疗.分别采用HE染色、Masson染色和免疫组化法检测肺组织病理改变和VEGFA蛋白的表达,采用qRT-PCR法检测肺组织中ceRNA调控网络中关键基因的表达.体外实验观察平喘颗粒含药血清对脐静脉内皮细胞形态、增殖、迁移和ceRNA调控网络中关键基因表达的影响.结果:差异分析共得到816个差异lncRNA,其中下调86个,上调730个,3 171个差异mRNA,其中下调354个,上调2 817个.通过预测lncRNA结合的miRNA共206个,miRNA靶向调控的mRNA共1 269,取交集后得到300个差异mRNA,并构建ceRNA网络.体内实验表明,与模型组比较,平喘颗粒能够显著抑制哮喘气道炎症、胶原沉积和VEGFA蛋白的表达,同时降低肺组织中lncRNA MALAT1和VEGFA mRNA的表达(P＜0.05).体外实验表明,过表达lncRNA MALAT1后HUVEC细胞增殖和迁移数量显著增加(P＜0.05).与MALAT1过表达组比较,平喘颗粒组能够显著抑制HUVEC细胞增殖和迁移,抑制HUVEC细胞lncRNA MALAT1和VEGFA mRNA的表达,增加miR-140-5p的表达(P＜0.05).结论:平喘颗粒能够下调肺组织中lncRNA MALAT1的表达,通过内源性竞争机制进而增加miR-140-5p与VEGFA的结合,从而促进其降解,达到抑制血管新生的作用.
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