荷斯坦奶牛瘤胃微生物元基因组BAC文库的构建与分析

• 作 者: 朱雅新 王加启 马润林 黄力 董志扬
• 机 构: 新疆农业大学农学院,乌鲁木齐,830052中国科学院微生物研究所,微生物资源前期开发国家重点实验室,北京,100080;中国农业科学院畜牧研究所,反刍动物营养研究室,北京,100094;中国农业科学院
• 出 处: 微生物学报
• 发表日期: 2007年2期
• 关键词: 瘤胃微生物 细菌人工染色体文库 筛选

采用未培养技术和脉冲场电泳技术直接从瘤胃微生物提取到大小在2Mb左右混合微生物DNA,经 HindⅢ不完全酶切获得50～100kbDNA片段, 将其连接在pCC1BAC载体上,转化 E.coli EPI300,得到瘤胃微生物BAC文库,经对文库的鉴定分析,该文库的平均插入片段54.5kb,空载体率小于2%, 库容837Mb,共保存15360个克隆.通过对该文库进行部分酶活性筛选,获得具有淀粉酶活性的克隆16个;纤维素酶活性的克隆26个,而且能降解纤维素的克隆中25个呈现多酶活性.这些结果表明该文库具有重要研究价值.