【摘 要】
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对苏云金芽孢杆菌C002菌株cry2Ab基因阳性克隆pHT315-2Ab进行亚克隆和序列测定,在CenBank注册后经国际Bt杀虫蛋白基因委员会正式命名为cry2Ab3.序列分析表明该基因含有芽孢杆
【机 构】
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中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室
【基金项目】
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国家转基因植物研究和产业化专项基金
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对苏云金芽孢杆菌C002菌株cry2Ab基因阳性克隆pHT315-2Ab进行亚克隆和序列测定,在CenBank注册后经国际Bt杀虫蛋白基因委员会正式命名为cry2Ab3.序列分析表明该基因含有芽孢杆菌特异的RBS序列,但没有功能性启动子,为沉默基因.根据大肠杆菌T7表达载体pET-21b克隆位点和cry2Ab3开放阅读框架(ORF)两端序列,设计合成一对特异引物L2ab5和L2ab3,高保真PCR扩增获得cry2Ab3完整ORF,经酶切、连接构建了重组表达质粒pET-2Ab3.表达质粒导入大肠杆菌BL21
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