【摘 要】
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目的:探讨CD44变异亚型对急性白血病细胞增殖和迁移的影响.方法:选择对数生长期的急性白血病细胞株HL-60、THP-1和慢性白血病细胞株K562,采用荧光定量PCR法检测CD44v6mRNA的
【机 构】
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哈尔滨医科大学附属第四医院检验科 黑龙江哈尔滨150001
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目的:探讨CD44变异亚型对急性白血病细胞增殖和迁移的影响.方法:选择对数生长期的急性白血病细胞株HL-60、THP-1和慢性白血病细胞株K562,采用荧光定量PCR法检测CD44v6mRNA的表达.通过电转的方法转染CD44v6siRNA到HL-60和THP-1细胞抑制细胞的CD44v6表达,通过western方法检测CD44v6蛋白的抑制情况.将实验分成HL-60+N-siRNA、HL-60+ CD44V6-siRNA、THP-1+ N-siRNA、THP-1+CD44V6-siRNA共4组,培养24、48、72h后分别取细胞悬液用台盼蓝染色后计数活细胞数检测细胞的增殖情况;使用Transwell小室培养法观察HL-60和THP-1细胞的迁移率.结果:通过荧光定量PCR方法检测THP-1和HL-60细胞均高表达CD44v6(分别为0.0037±0.0007和0.00292±0.0002),明显高于K562的表达(P< 0.01);转染后的HL-60和THP-1细胞株中CD44v6蛋白表达水平明显下调,细胞计数结果显示转染CD44v6-siRNA的HL-60和THP-1细胞在24、48和72 h增殖均明显下降.迁移实验结果显示THP-1+N-siRNA和HL-60+ N-siRNA细胞的迁移率为17%和23%,与相应对照组相比THP-1+CD44v6-siRNA和HL60+ CD44v6-siRNA组细胞24h迁移率明显下降(分别降至11%和14%).结论:CD44v6可以通过干预白血病细胞的增殖和迁移能力,参与调解白血病细胞的增殖和髓外进展.
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