【摘 要】
：
目的 从兔外周血总RNA中直接扩增出IgG重链可变区基因.方法 先从IMGT/GENE-DB数据库中获取编码大耳白兔免疫球蛋白(Ig)重链可变区(VH)的3个胚系基因片段VH(IGHV)、D(IGHD)和J
【机 构】
：
舟山医院细胞分子学实验室,浙江海洋学院海洋科学学院海洋生物资源及分子工程实验室
【基金项目】
：
浙江省科技计划面上社会发展资助项目
论文部分内容阅读
目的 从兔外周血总RNA中直接扩增出IgG重链可变区基因.方法 先从IMGT/GENE-DB数据库中获取编码大耳白兔免疫球蛋白(Ig)重链可变区(VH)的3个胚系基因片段VH(IGHV)、D(IGHD)和JH(IGHJ),以及编码γ重链恒定区(CH)基因Cγ(IGHG)的cDNA序列,然后设计嵌套引物,以兔外周血总RNA为模板,进行RT-PCR和Nested-PCR扩增,产物经胶回收后克隆到T载体,随机挑选白色克隆测序,最后将序列用Bioedit软件的Local Blast功能比对出Cγ的基因型,同时提交到IMGT/V-QUEST分析出所属的VH、D和JH胚系基因.结果 获得25个克隆的插入子序列,每个克隆均为兔IgG重链可变区的编码基因,且包含了完整的VH、D、JH胚系基因片段,以及Cγ基因第1个外显子(CH1)序列的5’端部分,但没有任何2个克隆的序列完全相同.37个IGHV功能基因出现了2个;11个IGHD功能基因出现了8个;11个IGHJ功能基因出现了4个.VH-D-JH组合方式共出现18种,即使VH-D-JH组合方式相同,序列仍具有明显的差异.结论 从兔外周血总RNA中直接扩增出了IgG重链可变区,自行设计的引物显示出了高度的特异性和良好的兼并性.
其他文献
为预测T4新菌系在我国未来小麦条锈菌的流行趋势,本研究以高感品种铭贤169为试材,以我国条锈菌5个主要流行小种(菌系)CYR29、CYR31、CYR32、CYR33、Su11-4为对照,采用主成分
环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种特异、灵敏、快速的新型基因检测技术。本研究以香蕉条斑病毒(Banana streak virus,BSV)ORF3保守区域为
构建灰色模型和ARMA模型的组合模型,并在此基础上构建等维递补模型预测轨检车TQI数据,根据预测数据与实际数据的误差实时调整预测模型.将该模型应用到轨检车TQI数值的预测上,
随着社会经济的发展和组织变革的推进,企业劳动关系的运行机制始终处于一种动态的演化发展中.从企业内部的人力资源管理入手,以员工的心理层面为切入点构建企业内部和谐劳动
基于Charleston×东农594重组自交系群体,采用完备区间作图和混合线性模型对2006-2010年连续5年的百粒重QTL进行定位,并进行基因×环境互作及上位性分析。结果定位了16个与大
为解决项目管理中承包商不努力工作的问题,运用信息经济学中的委托代理理论,建立了业主一承包商间的激励数学模型.构造了努力产出函数和努力成本函数,求出了业主的最优激励水
在分析宁夏城乡发展差距的基础上,探讨了城乡差距不断拉大的原因.提出了统筹宁夏城乡发展的有关建议:创新制度,发展工业,以工补农,重视教育,建立社会保障体系.
以初始体重(13.80±0.40)mg的大黄鱼(Pseudosciaena crocea R.)稚鱼为对象,在室内系统内进行饲养试验,研究了新开发的3种微颗粒饲料(Diet 1–Diet 3)、混合饲料(Diet 4:Diet
从生产力、稳定性、恢复性、公平性和协调性5个方面,采用显示过程的系统综合指标量化方法,对武汉市1990～2007年土地利用可持续性进行了评价.结果表明:武汉市土地利用的可持续