【摘 要】
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目的:探讨高糖诱导肾小球系膜细胞增殖、凋亡及炎症反应的相关机制,为防治糖尿病肾病(DN)提供一定参考.方法:培养人肾小球系膜HGMC细胞株,分为空白对照组、高糖组(30 mmol/L高糖)、通路抑制剂组(5μmol/L Toll样受体4(TLR4)抑制剂TAK-242+30 mmol/L高糖).采用MTT法、AnnexinV-FITC/PI双染法分别检测细胞增殖、凋亡能力;蛋白免疫印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及TLR4/c
【机 构】
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山东大学附属淄博市中心医院内分泌科 淄博 255036
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目的:探讨高糖诱导肾小球系膜细胞增殖、凋亡及炎症反应的相关机制,为防治糖尿病肾病(DN)提供一定参考.方法:培养人肾小球系膜HGMC细胞株,分为空白对照组、高糖组(30 mmol/L高糖)、通路抑制剂组(5μmol/L Toll样受体4(TLR4)抑制剂TAK-242+30 mmol/L高糖).采用MTT法、AnnexinV-FITC/PI双染法分别检测细胞增殖、凋亡能力;蛋白免疫印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及TLR4/c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路相关蛋白TLR4、髓样细胞分化蛋白88(MyD88)、JNK、p-JNK、TNF-α、MCP-1水平.结果:与空白对照组比较,高糖组HGMC细胞增殖抑制率、凋亡率、Bax蛋白水平降低(P<0.05),PCNA、Bcl-2、TLR4、MyD88、p-JNK/JNK、TNF-α、MCP-1蛋白升高(P<0.05);与高糖组比较,通路抑制剂组HGMC细胞增殖抑制率、凋亡率、Bax、蛋白水平升高(P<0.05),PCNA、Bcl-2、TLR4、MyD88、p-JNK/JNK、TNF-α、MCP-1蛋白水平降低(P<0.05).结论:高糖可诱导HGMC细胞增殖,抑制细胞凋亡并加重炎症反应,可能是通过激活TLR4/JNK信号通路实现的.
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