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目的构建携带E.coli可溶性吡啶核苷酸转氢酶(UdhA)基因的双启动子双基因表达载体,鉴定此载体系统对表达效率不高的链球菌异柠檬酸脱氢酶(SmIDH)的促进表达。方法PCR法扩增SmIDH基因,插入pBluescript ⅡSK(+)得表达载体pSX。从E.coli基因组扩增UdhA基因,插入pBluescriptⅡSK(+),构建表达载体pUX。再用以pUX为模板PCR扩增lac启动子和udM基因片段,插入pSX中,获得双启动子双基因表达载体pUS。IPTG诱导表达,SDS—PAGE鉴定SmIDH的表