【摘 要】
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目的 观察逆转录病毒转病毒白细胞介素-10(vIL-10)基因在体内的表达.方法用MSCVneo-vIL-10重组体在体外转导CBAh-2K)小鼠的造血干细胞hSCs),给经致死照射(900rads)的20只同基因CBAh-2K)小鼠注入经MSCVneo-vIL-10转染hSCs,2×106hSCs/只.酶联免疫吸附测定(ELISA)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot
【机 构】
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广西医科大学第一附属医院肝胆外科,530021,200438,上海,第二军医大学东方肝胆外科医院
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目的 观察逆转录病毒转病毒白细胞介素-10(vIL-10)基因在体内的表达.方法用MSCVneo-vIL-10重组体在体外转导CBAh-2K)小鼠的造血干细胞hSCs),给经致死照射(900rads)的20只同基因CBAh-2K)小鼠注入经MSCVneo-vIL-10转染hSCs,2×106hSCs/只.酶联免疫吸附测定(ELISA)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot分析vIL-10的表达.结果移植MSCVneo-vIL-10转hSCs的20只小鼠,移植后8周用ELISA检测,其中15只小鼠血清的vIL-10浓度为: 270～ 1340ng/L,5只小鼠血清的vIL-10为阴性.12周后有2只小鼠vIL-10测不出,13只小鼠长时间表达vIL-10达6个月.对照组小鼠血清vIL-10均为阴性.RT-PCR和Western blot证实小鼠的器官均有vIL-10的mRNA和蛋白的表达.结论逆转录病毒能有效地将vIL-10基因导入造血干细胞并在体内长时间表达。
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