【摘 要】
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目的 探讨miR-21-5p对缺氧诱导的人肺动脉内皮细胞(human pulmonary artery endothelial cell,HPAEC)损伤的影响及其相关机制.方法 使用RT-qPCR检测在常氧和缺氧条件下HPAEC中miR-21-5p的表达水平.将miR-21-5p mimic转入HPAEC后,通过LDH活性分析法、Hoechst染色、Annexin V-FITC/PI染色和Cleaved caspase-3水平Western blot检测评估细胞损伤情况.通过生物信息学、荧光素酶活性法和
【机 构】
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南阳市中心医院呼吸内科二病区,南阳 473000
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目的 探讨miR-21-5p对缺氧诱导的人肺动脉内皮细胞(human pulmonary artery endothelial cell,HPAEC)损伤的影响及其相关机制.方法 使用RT-qPCR检测在常氧和缺氧条件下HPAEC中miR-21-5p的表达水平.将miR-21-5p mimic转入HPAEC后,通过LDH活性分析法、Hoechst染色、Annexin V-FITC/PI染色和Cleaved caspase-3水平Western blot检测评估细胞损伤情况.通过生物信息学、荧光素酶活性法和功能修复实验来验证miR-21-5p是否通过靶向Krüeppel样因子6(Krüeppel-like factor 6,KLF6)编码基因的3\'-非翻译区(3\'-UTR)来发挥生物学效应.结果 miR-21-5p在缺氧条件下的HPAEC中表达下调;过表达miR-21-5p能显著降低缺氧诱导的HPAEC的LDH释放和凋亡.KLF6是miR-21-5p的靶基因,miR-21-5p能下调KLF6的蛋白表达水平.在缺氧条件下,过表达KLF6能消除miR-21-5p对HPAEC的保护作用.结论 miR-21-5p能通过下调KLF6的蛋白表达来抑制缺氧诱导的HPAEC损伤.
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