探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)在小鼠肠道缺血再灌注损伤信号转导通路中的作用。
方法SPF级雄性C57BL/6小鼠24只，随机分为3组：假手术组、对照组和HMGB1抗体组(anti–HMGB1)，每组8只。对照组和anti–HMGB1组在行肠道缺血手术前30 min分别经尾静脉注射磷酸盐缓冲液和HMGB1抗体。所有小鼠均麻醉，开腹，对照组和anti–HMGB1组用无创血管夹夹闭肠系膜上动脉60 min后松夹再灌注60 min，假手术组仅开腹，不进行夹闭。光镜下观察3组小鼠肺脏、空肠和回肠组织形态学变化；分别应用髓过氧化物酶(MPO)试剂盒、酶联免疫吸附试验、real–time PCR和Western blot检测MPO活力、血浆核因子(NF)–κB p65、白细胞介素(IL)–6和肿瘤坏死因子(TNF)–α浓度、空肠、回肠及肺脏中HMGB1和NF–κB mRNA和蛋白表达水平。所得数据采用单因素方差分析进行统计学检验。
结果对照组和anti–HMGB1组小鼠血浆炎性因子IL–6、TNF–α、NF–κB p65均较假手术组升高(假手术组、对照组、anti–HMGB1组的NF–κB p65分别为104.64±11.89、228.53±24.85、145.00±33.63，F＝38.036，P<0.05；IL–6分别为50.02±6.33、104.91±31.18、62.28±6.73，F＝49.763，P<0.05；TNF–α分别为43.79±4.18、70.81±6.97、52.76±5.71，F＝34.571，P<0.05)。anti–HMGB1组3种炎性因子表达水平均低于对照组(P值均<0.05)。对照组和anti–HMGB1组小鼠肝脏和肺脏组织的MPO活力均较假手术组升高。与假手术组相比，对照组小鼠空肠、回肠和肺脏组织的损伤严重，anti–HMGB1组小鼠的损伤程度小于对照组。对照组和anti–HMGB1组小鼠肺脏和回肠的HMGB1 mRNA和NF–κB mRNA的表达均高于假手术组(假手术组、对照组、anti–HMGB1组肺脏HMGB1 mRNA分别为1.04±0.19、2.25±0.18、1.89±0.18，F＝66.203，P<0.05；回肠HMGB1 mRNA分别为1.14±0.54、6.26±0.60、4.93±0.55，F＝133.427，P<0.05；肺脏HMGB1 mRNA分别为1.03±0.21、2.04±0.29、1.42±0.23，F＝26.229，P<0.05；回肠NF–κB mRNA分别为1.03±0.23、3.71±0.53、2.23±0.55，F＝50.477，P<0.05)。肠道缺血再灌注损伤后，对照组和anti–HMGB1组的肺脏和空肠、回肠组织中HMGB1和NF–κB蛋白表达较假手术组增加，但anti–HMGB1组较对照组降低。
结论阻断HMGB1与TLR4结合可有效减轻小鼠肠道缺血再灌注造成的组织损伤。